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微生物学

实验动物的接种

2024-04-19 微生物学 加入收藏
简介实验动物接种途径可根据病毒感染特性和检测目的来确定,并根据病毒选择实验动物种类和病毒接种量,分为皮下接种、腹腔接种、静脉接种、消化道接种、鼻腔接种、颅内接种

简介

实验动物接种途径可根据病毒感染特性和检测目的来确定,并根据病毒选择实验动物种类和病毒接种量,分为皮下接种、腹腔接种、静脉接种、消化道接种、鼻腔接种、颅内接种等。

材料与仪器

器材:


①孵育箱


②剪刀、镊子


③注射器


试剂:


①材料:实验动物


②消毒剂(2.5% 碘酒和 75% 酒精)

步骤

实验动物的几种接种方法基本过程如下:


(1) 皮下接种:注射时轻轻捏起皮肤,手持注射器将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下;大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;狗多在大腿外侧注射。皮下接种多用于观察动物病毒感染后的免疫学指标。


(2) 腹腔接种:固定动物,消毒皮肤,在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约 0.5 cm,再使针头与皮肤呈 45°夹角刺入腹腔,回抽无肠液、尿液后,缓缓注射。大鼠和小鼠的接种多用此方法。可用千病毒感染及感染后免疫指征的观察,或作为抗病毒的给药途径。


(3) 静脉接种:可造成病毒全身性感染,可观察病毒的致病性或机体对病毒的清除机制。小鼠、大鼠的静脉注射常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有 3 根,左右两侧和背侧各 1 根,两侧尾静脉比较容易固定,常被采用。豚鼠的静脉注射一般采用前肢皮下静脉注射。兔的静脉注射一般采用外耳缘静脉注射。


(4) 消化道接种:在分离腹泻病毒或消化道病毒感染的研究中,可采用灌胃接种法将所接种的临床标本或病毒用灌胃器灌到动物胃内。抓取固定小鼠,用灌胃器吸取接种物,将灌胃针从鼠的口腔插入,使口腔与食道成一条直线,再将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道,可感到轻微的阻力,此时可略改变灌胃针方向,顺势接种,接种量为 0.2 mL/10 g 体重。


(5) 鼻腔接种法:动物经乙酪麻醉后,固定动物使头部仰起,经注射器将接种物滴入动物鼻腔,接种量为小鼠 0.03~0.05 mL,大鼠 0.05~0.1 mL。


(6) 颅内接种法:将临床标本或特定的病毒直接接种于动物脑内,使动物形成实验性中枢神经系统感染。


1) 小白鼠颅内接种:接种时用拇指与示指固定鼠头,消毒注射部位,于眼后角、耳前线和颅中线构成的三角区域中间进行注射,进针 2~3 mm。注射量为乳鼠 0.02 mL,成年鼠 0.03 mL。


2) 豚鼠与家兔颅内接种:颅中线旁约 5 mm 平行线与经动物瞳孔横线交叉部位注射。去毛,消毒注射部位,固定皮肤,钻头刺穿颅骨,拔钻后沿钻孔进针。选 25 或 26 号针头,进针深度 4~10 mm,注射量为 0.10~0.25 mL。操作在麻醉下进行。


(7) 角膜接种法:乙醚或 5% 可卡因局部麻醉家兔,细针尖轻划角膜,划痕与眼裂平行,约三道。接种液滴加 2~3 滴,接种后 48~72 小时观察结果。


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