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一种优化的PCR 方法——降落PCR 扩增目的基因
多聚酶链式反应( PCR) 是在模板DNA、引物和4 种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖DNA 聚合酶的酶促反应[1 ] 。在实验室日常工作中经常出现两种情况:一
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PCR-ASO分型技术标准
1、引物设计由美国Perkin-elmer公司合成,引物末端标记有生物素(1)扩增体系10PCR buffer 5μlPCR引物 10μl4dNTP 10μlT
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如何提高PCR反应的特异性
引物设计:引物长度适当,18-24mers,并保证序列独特性,以降低序列在非目的片段中存在的可能性,但长度大于24核苷的引物并不意味着有更高的特异性,较长的序列
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影响PCR的主要因素
PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA,然后才进行自动热循环,最后进行产物鉴定与分析。引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行,临
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定量PCR常见问题解答
1、定量PCR仪的开关机顺序是怎样的?按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率。开机顺序:先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量P
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实时定量PCR技术在恶性肿瘤诊断中的应用
背景:生物科学和有关技术的发展为恶性肿瘤的诊断和治疗提供了分子学依据。当前,外科病理学主要依据肿瘤的解剖特点(如:转移瘤)和组织病理学对恶性肿瘤分类。微阵列连同
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PCR技术(六):PCR技术应用进展
PCR技术自1985年建立以来,发展之迅速、应用之广泛,表明其具有强大的生命力。近些年来,基于PCR的基本原理,许多学者充分发挥创造性思维,对PCR技术进行研究
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Real-Time RT-PCR
RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction) is the most sensitive t
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PCR技术系列十六:PCR产物测序
PCR技术代替了为测序而反复进行的分子克隆和模板制备步骤。PCR技术与自动测 序技术相结合后,它将成为一种最快、最有效的测定核苷权序列的方法。本章主要综 述各种
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基因体外扩增技术(二)
基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法
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提高PCR特异性的方法
1、引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的
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增加PCR特异性的八个方面
1、引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的
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PCR实验操作程序
一、实验步骤1. 在无菌的0.5ml或0.2ml离心管中按下列操作程序加样:反应物体积(μl)终浓度去离子水29.410Buffer B514dNTP混合物5各
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PCR拖尾及假阳性的原因及对策
一、拖尾现象:产物在凝胶上呈Smear状态。原因:1.模板不纯2.Buffer不合适3.退火温度偏低4.酶量过多5.dNTP、Mg2+浓度偏高6.循环次数过多对
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标准的PCR实验室简介
1.主体结构主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝,从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固,线条简明,美观大方,密封性好