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PCR实验技术总结
PCR技术简史一、PCR的最早设想核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核
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差异显示技术(DD-PCR)及其应用
高等植物在其生命活动过程中,由于基因的选择性表达,决定了高等植物生命活动的多样性和连续性。在植物的生长、发育、衰老和死亡过程中,都有不同的基因起作用。因此,研究
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随机引物PCR
随机引物 PCR一. 实验原理聚合酶链式反应( Polymerase chain reaction )简称 PCR ,它是一种 DNA 体外扩增技术。 1985
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Real time PCR 跟RT-PCR有什么区别
实时荧光定量PCR原理所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量
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基因克隆策略与引物设计原则
1、功能基因克隆的基本策略① 根据已知的脊椎动物某一特定基因的氨基酸序列的保守区域设计简并引物,利用RT-PCR技术获得该基因的核心片断,将该片断分离纯化后与T
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减少PCR产物中引物二聚体的方法
1.从引物自身着手,重新设计引物,这是最根本解决这一问题的办法。2.可能模板有问题,模板浓度过小,适当加大模板量。3.Taq酶,引物,Mg2+浓度可能过高,可降
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一些供评比的PCR仪器生产商/品牌
PCR 技术现在已成为现代分子生物学实验工作的基础技术和有效工具,在医学、农业、检验检疫等领域中使用十分广泛。其核心设备-PCR仪经过不断改进,已经越来越完善和
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PCR反应模板的制备
PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计,酶的质量。模板的制备,在前二者都稳定可行的情况下,PCR模板的制备尤为重要。模板处理方法的选择及操作人员的基本技能,
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荧光定量PCR:简介、原理、应用
荧光定量PCR简介荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08年
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什么是TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)
在分子生物学研究中,基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA序列邻近的未知序列,TAIL-PCR又叫热不对称交错PCR,能够较好地解决上述难题。该
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PCR反应中Taq酶的选择
随着分子生物学研究发展的不断广泛和深入,PCR已成为一门相当成熟的常规技术,而热聚合酶(即Taq酶)的合理选择是PCR成败与否的一个关键因素。目前市面上有多种T
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实时荧光PCR检测技术
众所周知,PCR(聚合酶链反应)技术自从1985年问世以来,经过十几年的发展,已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放
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PCR技术 PCR技术的应用
一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将
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PCR反应体系的循环参数
1、变性温度和时间:模板DNA和PCR产物的变性不充分是PCR失败的主要原因。适宜的变性条件是95℃ 30s或97℃15s。变性不完全,DNA双链会很快复性,因
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PCR不必“摸条件”
PCR是分子生物学科研人员必做的实验,为了扩增目的基因,经常要对PCR的体系进行“摸条件”,特别是一些GC含量高的目的基因或者DNA纯度不高的样本! “摸条件”