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PCR专题,引物设计
PCR引物设计的11条黄金法则 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基
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MethPrimer - Design Primers for Methylation PCRs
Welcome to MethPrimerMethPrimer is a program for designing bisulfite-conversion-
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荧光定量PCR技术及其应用(一)
荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常
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实时荧光定量 PCR技术原理与应用
聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过 放射性核
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PCR实验技巧
增加PCR的特异性: 1. prime理想的,只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件 a. 足够长,18-24bp,以保证特异性
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直接从PCR产物回收纯化DNA (Promega 公司试剂盒)
1)直接加90-100μl纯化缓冲液于1.5ml离心管,再加入30~300μl PCR反应物,Vortex混合; 2)加入1ml树脂轻轻Vortex 3次,每次
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PCR 引物设计的原则和要点
引物设计有3 条基本原则:首先引物与模板的序列要紧密互补,其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构,再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA 聚合反应。
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定 量 PCR 技 术 简 介
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是微量核酸扩增的有效工具,由于其灵敏、特异、快速等优点,在医学上已广泛应用与病毒、细
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Methylated CpG Island Amplification
Methylated CpG Island AmplificationProtocol written by Minoru Toyota2. Materials
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引物合成介绍
1. 引物是如何合成的? 目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。 DNA 合成仪有很多种 , 主要都是由 ABI/PE 公司生产,无论采用什么机器合成,合成的
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Single Primer (Semi-Random) PCR
DescriptionSingle primer PCR allows amplification from known to unknown regions
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PCR Additives
A variety of PCR additives and enhancing agents have been used to increase the y
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内切酶PCR反应中的活性
酶切反应条件如下:在20 µl PCR产物混合体系中加入5U的内切酶,按相应的反应温度温育1小时。通常20 µl PCR产物体系中含有1 µg底物DNA,1单位
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Standard PCR reaction
Steps for Standard PCR Reaction Design primers. In general, primers should have
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SSCP原理
SSCP原理及特点 日本Orita等研究发现,单链DNA片段呈复杂的空间折叠构象,这种立体结构主要是由其内部碱基配对等分子内相互作用力来维持的,当有一个碱基发生