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用经典 RACE 扩增 cDNA 的5’末端实验
材料与仪器GSP-RT 引物 poly(A)+RNA 或总 RNA 反转录缓冲液 RNA 酶 H RNasin SuperScriptII 逆转录酶 dNTP
PCR -
用 PCR 来制备编码随机肽的双链 DNA 文库实验
材料与仪器限制性内切酶和缓冲液 灭菌双蒸水 Tris-HCl 生物素标记的 PCR 引物链霉抗生物素蛋白磁性珠 琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备步骤一、材料1.
DNA -
用新 RACE 法扩増 cDNA 的 5'末端
材料与仪器缓冲液、溶液和试剂 酶和酶缓冲液 核酸和寡核苷酸特殊设备步骤第 1 阶段:降解 RNA 的去磷酸化一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙酸钠,3mol/L
RACE -
帽子转换 RACE 实验
材料与仪器寡核苷酸引物 cDNA 文库 HerculesHot-Start 聚合酶 HerculesHot-Start 聚合酶缓冲液 dNTP 溶液 TE 反转
RACE -
用 PCR 分析连接反应的底物和产物
材料与仪器ddH2O Vent 缓冲液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 引物 质粒 DNA琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备 热循环仪步骤一、材料1. 缓冲液、
PCR -
用 PCR 对一个随机多肽 DNA 文库的质量进行控制实验
材料与仪器ddH20 Vent 缓冲液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 引物 质粒 DNA琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备 热循环仪步骤一、材料1. 缓冲液、
PCR -
用 PCR 控制基因组 DNA 文库的质量实验
材料与仪器ddH20 Vent 缓冲液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 质粒 DNA PCR 引物琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备 热循环仪步骤一、材料1.
PCR -
克隆载体的准备实验
材料与仪器氯仿-异戊醇 酚:氯仿-异戊醇(25:24:1) 氯化锂 (LiCl 10mol L) 酚(Tris-饱和) TE 缓冲液 乙醇 碱性磷酸酶 平末端限
克隆载体 -
准备插入片段实验
材料与仪器缓冲液、溶液和试剂 酶和酶缓冲液 核酸和寡核苷酸专用设备步骤第 1 阶段:DNA 引物的激酶处理研究表明很多种 DNA 聚合酶(比如,T7、修饰过的
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制备克隆实验
材料与仪器ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶 平末端插入物 克隆载体 培养基FALCON 2059 多聚丙烯
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菌落 PCR 分析克隆的重组体实验
原理菌落PCR(Colony PCR)可不必提取基因组DNA,不必酶切鉴定,而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增,省时少力。使用载体上的通用引物
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核糖克隆实验
材料与仪器ATEN 缓冲液 DNA 缓冲液(TEN) KLA 缓冲液 T5E5 Dpn I Klentaq LA 蛋白酶 K 蛋白酶K储存缓冲液 RNA 酶 A
核糖克隆 -
顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验
材料与仪器ATEN 缓冲液 聚乙烯乙二醇 T5E5 缓冲液 Dpn I 蛋白酶 K RNA 酶 A 5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧
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诱变 PCR 实验
材料与仪器氯仿 异戊醇 乙醇 矿物油或者一个蜡珠 3mol L NaOAc 5 mmol L MnCl2 突变 PCR 缓冲液 DNA 聚合酶 Native T
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快速 PCR 定点突变实验
原理这种 PCR-SDM 方法的要点包括如下几个方面。1. 使用的模板浓度有所增加,这样就可以减少循环数,因此减少了非特异产物扩增的可能性。2. 加入了 Taq
PCR