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反向 PCR
原理标准 PCR 用来扩增位于两条引物内侧的 DNA 片段,与此相反,反向 PCR 技术(也被称为倒置或者向外 PCR)是用于扩增一段已知 DNA 序列旁侧的
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反向PCR
原理反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色体序列,因此又可称为染色体缓移或染色体步移。这时选择的引物虽然与核心DNA区两末端序列互补,但两引物3’
PCR -
免疫PCR
原理主要由两个部分组成,第一部分的免疫反应类似于普通的酶联免疫吸附试验(ELISA)的测定过程;第二部分即通常的PCR检测,抗原分子的量最终由PCR产物的多少来
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重叠延伸 PCR
原理OVERLAP PCR,也称重叠延伸 PCR,是指先将两个想要连在一起的序列记为 A、B,用一对具有互补末端(在原基因上选取使得引物 A2 的 5‘
PCR -
重叠延伸 PCR基本方案
原理重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,简称SOE PCR)由于采用具有互补末端的引物,使PCR产
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以 cDNA 为模板的 PCR 实验流程
原理以 mRNA 为模板,在反转录酶的催化下形成的互补DNA(complementary DNA)即为 cDNA,由于 cDNA 不像基因组DNA 那样有内含子
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以质粒为模板的 PCR 实验流程
原理聚合酶链式反应热变性温度下成熟质粒可以解螺旋、解聚,暴露的单链核苷酸序列可以作为模板,在特异引物、脱氧核糖核酸酶、DNA 聚合酶等存在的情况下扩增出大量目的
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菌落PCR
原理直接挑取菌落进行PCR,PCR的95℃加热可以破胞,释放基因组DNA或质粒,成为PCR体系的模板,然后进行链式扩增。材料与仪器菌落样品dNTP PCR混合液
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降落PCR
原理降落 PCR 是 Dn 于 1991 年最早发明的指每一个(或 n 个)循环降低 1(或 nC)退火温度,直至达到一个较低的退火温度,这个温度称为“touc
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降落 PCR基本方案
原理基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到
PCR -
ISPCR 扩增的产物的杂交和检测实验基本方案
材料与仪器探针SSC SDS 显影液 定影液 苏木精 PBS AEC 封阻液 NaCl Tris·Cl 二甲基甲酰胺 BCIP NBT 乙醇培养箱 盖玻片 载玻
ISPCR -
引物设计原理与方法
原理PCR 反应特异性扩增的一个关键条件是引物的正确设计,使用不合适的 PCR 引物容易导致实验失败:表现为扩增出目的带之外的多条带(如形成引物二聚体带),不出
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PCR引物设计及评价实验
原理聚合梅链式反应(polymerase chain reaction)即PCR技术,是一种在体外快速扩增特定基因或DNA 序列的方法,故又称基因的体外扩增法。
PCR -
荧光标记法
原理荧光,又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比
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mRNA差异显示法
原理几乎所有的真核基因mRNA分子的3’-末端,都带有一个多聚的腺苷酸结构,即通常所说的poly(A)尾巴。因此,在RNA聚合酶的作用下,可按mRNA为模板,以