吉姆萨染色法检测细胞凋亡
简介吉姆萨（Giemsa）是一种复合染料，含天青 II 和伊红，适于血涂片、体外培养细胞和染色体等的染色。原理吉姆萨染色法检测细胞凋亡的基本原理是吉姆萨含天青 II 和伊红，适于血涂片、体外培养细胞和染色体等的染色。材料与仪器器材：染色缸、载玻片（预先经多聚赖氨酸或其他贴片剂处理）、盖玻片、计数板、10 ml 吸管、吸管橡皮球、15 ml 离心管、微量移液器吸头、细胞涂片离心机、超净台、37 ℃
简介
吉姆萨（Giemsa）是一种复合染料，含天青 II 和伊红，适于血涂片、体外培养细胞和染色体等的染色。
原理
吉姆萨染色法检测细胞凋亡的基本原理是吉姆萨含天青 II 和伊红，适于血涂片、体外培养细胞和染色体等的染色。
材料与仪器
器材：
染色缸、载玻片（预先经多聚赖氨酸或其他贴片剂处理）、盖玻片、计数板、10 ml 吸管、吸管橡皮球、15 ml 离心管、微量移液器吸头、细胞涂片离心机、超净台、37 ℃ CO2 孵箱、相差倒置显微镜、普通显微镜、100 μl 微量移液器、HeLa 细胞（或别的细胞）。
试剂：
① 凋亡诱导剂（根据情况自定）
② 固定液（4% 甲醛，或多聚甲醛）
③ 磷酸缓冲液（PBS）
（M/15 酸氢二钠 49.6 ml，M/15 磷酸二氢钾 50.4 ml）
④ 消化液（0.02% EDTA）
⑤ 梯度乙醇
⑥ 二甲苯
⑦ 分化液（75% 乙醇-0.5% 盐酸）
⑧ 中性树脂
⑨ 吉姆萨染液原液（吉姆萨 0.5 g，加入甘油 33 ml，研磨后加入 33 ml 甲醇，放入 37～40 ℃ 温箱中 12 h，棕色瓶保存）。
步骤
吉姆萨染色法检测细胞凋亡的基本过程可分为如下几步：
A 制备细胞涂片 步骤同基本方案 1。
B 甲醇-冰醋酸固定 10 min。充分晾干，或用吹风机吹干。
C 滴加吉姆萨稀释染液（PBS 液：吉姆萨原液 = 10：1），染色 3～10 min。
D 流水冲洗，磷酸缓冲液分色（镜下控制颜色），晾干。
E 透明 二甲苯（I）和二甲苯（II）分别 1 min。
F 中性树脂封片。
G 显微镜下观察。
注意事项
应注意，在吉姆萨染色的第二步一定要充分晾干，否则将影响染色结果。
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